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Southern blot印跡雜交檢測-DIG探針標記技術服務

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一、服務介紹:

Southern印跡雜交(Southern blot)是1975年由英國人southern創建,是研究DNA圖譜的基本技術,在遺傳病診斷、DNA圖譜分析及PCR產物分析等方面有重要價值。


Southern印跡雜交是進行基因組DNA特定序列定位的方法。其原理為利用瓊脂糖凝膠電泳分離經限制性內切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉移至尼龍膜或其他固相支持物上,經干烤或者紫外線照射固定,再與相對應結構的DIG標記探針進行雜交,用放射自顯影或酶反應顯色,從而檢測特定DNA分子的含量。


本公司使用最先進的自動化學發光成像檢測系統進行曝光,確保捕獲最佳信噪比的成像時間點,獲得較高質量的圖片,圖片可以直接用于SCI論文發表使用,達到國際期刊的要求。 

  本公司的Southern雜交技術可以檢測各種動物植物 微生物的基因組片段,探針的制作使用DIG(地高辛)標記,具有標記效率高,背景噪音少、無放射性污染的特點。本公司在實驗過程中保留原始數據,原始照片和實驗材料,數據真實可信,具有可重復性。


服務流程:
1.基因組DNA提取(單獨收費)
2.探針設計合成(單獨收費)
3.DIG探針標記
4.Southern雜交檢測
5. 提交給您電子版檢測報告,包括詳細操作程序和實驗結果等


二、服務報價:

服務項目 內容說明 價格 周期
基因組DNA提取 獲得高純50μg基因組DNA ¥300/樣品 1周
DNA探針設計合成 引物設計、合成及驗證 ¥600/基因 1-2周
DIG探針標記及Southern Blot檢測 標記一條探針,雜交一張膜,每張膜(1-8個樣品) ¥8000/膜 3-4
重復雜交 標記一條探針,雜交已有的膜。 4000/ 1-2

Southern Blot檢測,如果重復2次實驗仍結果不理想(背景深等),將收取5000元/膜的基礎費用。
重復雜交,如果重復2次實驗仍結果不理想(背景深等),將收取3000元/膜的基礎費用。


三、客戶提供材料:

1.用于實驗,Southern雜交的高質量DNA樣品質量至關重要,決定實驗的結果的成敗。建議委托本公司提取,以便于提高效率節省時間。

2.基因組DNA檢測:OD260/OD280=1.8-2.0,基因組要求DNA總量不小于60ug,濃度大于500ng/uL;客戶需要提供基因組DNA檢測圖片以及NANO Drop 2000等檢測儀的檢測結果,要求無降解,無蛋白污染,電泳檢測標準請參考。

3.檢測樣品低溫運輸至公司,最可靠選擇干冰,順風快遞運輸。

4.客戶需提供用于雜交的目標基因序列和含有待雜交基因的陽性質粒(50uL以上),我們會依據Southern blot實驗要求重新選擇全長或部分區域作為探針序列,標記地高辛探針。

5.客戶如果無法提供高品質的,達到實驗要求的基因組DNA樣品,本公司可以幫助制備可用于Southern Blot檢測的DNA樣品,客戶需要提供足夠量的組織樣品,細胞樣品或者菌液樣品(建議干冰順豐快遞運輸)。

6.客戶需要選擇合適的DNA內切酶將基因組DNA片段化,即彌散化結果。如果實驗需要用到非常規的限制性內切酶或者需要本公司進行選擇,需額外加收酶切費用和設計費用,并且客戶需提供 實驗中用到的一系列基因序列信息。 


四、實驗流程:

1.制備待測DNA

2.DNA限制酶消化 

3.瓊脂糖凝膠電泳分離待測DNA樣品 

4.電泳凝膠預處理

5.轉膜

6.探針標記 

7.預雜交

8.Southern雜交

9.洗膜

10.放射性自顯影檢測 

11.實驗結果分析及報告

 

五、提供結果:

本公司負責對客戶提供樣品進行DIG探針標記與Southern雜交檢測技術服務,最終提供檢測報告及檢測圖片。

1、DNA樣品檢測報告(實驗樣品不返還,請注意保留備份)

2、標準實驗流程報告

3、southern blot實驗結果檢測報告

4、如果是實驗有額外的要求,請提前致電或郵件進行溝通說明。

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